Что такое анализ на кишечные инфекции. Анализ пцр кала

Положительный результат анализа кала на хеликобактер служит достоверным доказательством заражения человека. Исследование относится к прямым видам, когда выявляется конкретный возбудитель или его ДНК, а не последствия его воздействия или продукты распада (как при проведении иммунологических анализов крови).

Кроме того, достоинством способа является его неинвазивность - отсутствие необходимости применять для забора материала более или менее травматичные процедуры (прокола вены для взятия крови, введения дуоденального зонда).

Проведение анализа кала не связано с присутствием пациента, достаточно своевременной доставки в лабораторию испражнений. Это особенно важно для обследования детей.

Существуют разные методики выявления Helicobacter pylori, каждая обладает своими достоинствами и недостатками.

Лечащий врач определяет необходимость и выбор способа исследования. Немалое значение имеет доступность анализа для конкретного пациента из-за цены. Большая часть выполняется только в частных клиниках и лабораториях, поскольку требует дорогостоящего оборудования.

Цель исследования - выявление причинной связи заболевания с хеликобактер и назначение целевого курса лечения для избавления от возбудителя.

Что представляет собой хеликобактерия?

Название Helicobacter pylori переводится как «спиралевидная привратниковая». Оно привязано к характерной форме бактерии, локализации в области привратника (приграничная зона желудка с двенадцатиперстной кишкой). Микроорганизм имеет жгутики, помогающие ему перемещаться даже в густой слизи.

Хеликобактерия способна выдерживать кислую среду желудочного сока. Для жизнеобеспечения использует энергию молекул водорода, которую вырабатывают кишечные бактерии.



Бактерия синтезирует около 20 ферментов

Наиболее известные ферменты хеликобактер:

  • оксидаза,
  • уреаза,
  • каталаза.

К особенностям микроорганизма относятся:

  • сложность выделения культуральным способом, поскольку хеликобактерия не растет на обычных питательных средах;
  • длительный период отсутствия симптоматики, указывающей на заражение;
  • возможность в «опасной» ситуации трансформироваться в шаровидную форму и покрываться защитной пленкой.

Агрессивность бактерии является основной причиной атрофической формы хронического гастрита с дальнейшим переходом в язвенную болезнь и раковую опухоль.

В кале спиралевидную форму обнаружить невозможно, поскольку кишечная среда неблагоприятна для существования хеликобактерии. Здесь не имеется нужной кислотности, мало кислорода, действуют сильные разрушающие ферменты желчи, поджелудочной железы. Поэтому в каловых массах находится кокковая форма бактерии.

Симптомы поражения желудка, вызванные хеликобактерией, могут быть минимальными или соответствовать клинике обострения заболевания. У пациента наблюдаются:

  • вздутие живота;
  • отрыжка;
  • изжога;
  • болевой синдром, особенно при обострениях весной и осенью;
  • запоры или поносы;
  • чувство тяжести в эпигастрии;
  • снижение аппетита;
  • резкое падение веса.

Показаниями к исследованию могут быть:

  • необходимость проверки перед длительным курсом терапии нестероидными противовоспалительными лекарствами, ингибиторами протонной помпы, поскольку они снижают выработку соляной кислоты в желудке;
  • признаки железодефицитной анемии;
  • неясная тромбоцитопения;
  • возможность заражения членов семьи;
  • контроль проведенного курса антибиотикотерапии;
  • выяснение связи с генетической предрасположенностью.

У ребенка о признаках заражения говорят жалобы на тошноту, неясные боли в животе, плохой аппетит и отказ от еды, частое обильное срыгивание, а также вздутие и урчание живота.

Способ бактериологического посева

Выделение культуры возбудителя - микробиологический вид исследования. Классика способа требует посева материала на питательную среду, подсчета выросших колоний, исследования микроорганизма из колонии под микроскопом. Также необходимо проведения биохимических проб для изучения его свойств и дополнительного посева на среду с антибиотиками для выявления чувствительности к разным препаратам.



Среда для посева довольно дорогая, готовится специально

Анализ кала на хеликобактер пилори с помощью культурального способа провести сложно:

  • посев должен проходить без доступа кислорода;
  • можно выделить только спиралевидные формы, которые редко попадают в кал, а не кокковые;
  • результаты реакции на чувствительность к антибиотикам in vitro (инвитро означает «на стекле, в пробирке») на практике оказываются обманчивыми и в некоторых случаях не совпадают с фактическим применением у пациента (in vivo), обнаруженный оптимальный антибиотик оказывается недостаточно эффективным;
  • анализ требует длительного срока (7–10 дней) для полного проведения.

По этим причинам использование метода для диагностики ограничено.

Иммунологические способы исследования

Суть иммунологического анализа - выявление комплексов антитело+антиген, в котором чужеродным агентом является хеликобактерия. Более привычно использование по исследованию крови. Но фактически косвенные признаки наличия антигена можно подтвердить по наличию в стуле, слюне, моче, у беременных в околоплодной жидкости.

В методиках используются готовые «помеченные» антитела. При обработке ими кала пациента, содержащего антигены (остатки хеликобактерии) возникает реакция соединения со стандартными антителами. Длительность исследования - сутки. Анализ кала на антиген хеликобактер назначается, если у пациента имеются любые симптомы нарушения пищеварения.

Наиболее распространенный вариант - первичный скрининг населения (обследование всех обратившихся или определенных групп), не имеющего специфических жалоб. В России не применяется из-за отсутствия достаточного количества иммунологических тестов в лабораториях поликлиник.

Метод ПЦР

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) относится к молекулярно-генетической диагностике. С ее помощью выявляется не бактерия, а ее специфическая ДНК. Даже при малом количестве, в случае выздоровления или бессимптомного носительства метод позволяет с достаточной точностью связать изменения в организме с действием хеликобактер.



Длительность анализа экспресс-методом 5–6 часов, обычным - 2–3 суток

Методика рассчитана на искусственный синтез отдельных частей ДНК, удвоение и построение цепочки из 30 циклов. Процесс не происходит в случае отсутствия малейших остатков биоматериала. Для реакции необходим прибор ампликатор. Полимераза - фермент, ускоряющий процесс.

ПЦР кала назначают для подтверждения роли хеликобактерии в патологии и определения целесообразности специфической терапии:

  • при эрозиях и язвах в желудке, пищеводе и двенадцатиперстной кишке;
  • желудочно-пищеводном рефлюксе (заброс содержимого в обратном направлении);
  • атрофическом поражении слизистой желудка;
  • полипах;
  • опухолях желудка;
  • выявлении наследственной предрасположенности в случае наличия у родственников злокачественных опухолей органов пищеварения;
  • контроле за результатами терапии антибиотиками.
  • высокую чувствительность и специфичность (соответственно определяются в 94% и 100%), реакция бывает положительной даже при наличии 10 бактерий;
  • простоту проведения;
  • безопасность для пациента, отсутствие травматичности при заборе материала;
  • возможность определения ДНК как в спиралевидных, так и в кокковых формах хеликобактерии;
  • выделение и изучение различных генетических модификаций, штаммов.

Результат редко выдает ложноположительную информацию при отсутствии инфицированности человека.

Недостатки исследования:

  • не представляется возможность определения оптимального антибиотика по чувствительности;
  • нет различий между протекающим острым заболеванием и остаточными явлениями после обострения, ДНК бактерий остаются в кале почти месяц после клинического выздоровления;
  • чувствительность все-таки ниже, чем при исследовании биоптата из стенки желудка;
  • сравнительно высокая стоимость;
  • необходимость подготовки персонала и приобретения оборудования;
  • положительная реакция в случаях загрязнения персоналом материала из чужого образца (контаминация извне).



ПЦР-лаборатория имеет усовершенствованную технику, позволяющую получить достоверные результаты диагностики

Как оценить результаты анализов?

Расшифровка результатов исследования - дело врача специалиста. Не стоит прибегать к самостоятельной трактовке или пользоваться услугами знакомых. Оценка проводится по комплексу признаков. При ПЦР выдается результат:

  • отрицательный, если не выделился генотип хеликобактерии, обнаруживается в норме;
  • положительный, если у пациента разгар заболевания или заражение было в анамнезе.

При бактериологическом исследовании:

  • выявлено нулевое количество бактерий или хеликобактер отсутствует;
  • если количество микроорганизмов больше нуля - подтверждается хелибактериоз;
  • знак S означает чувствительность к заявленному антибиотику;
  • R - указывает на устойчивость (резистентность) к препарату;
  • I - чувствительность умеренная.

Бакпосев кала позволяет дать не только качественную, но и количественную характеристику хеликобактериального заражения. Для этого учитываются степени роста бактерии:

  • 1 степень - наблюдается слабый рост на жидкой среде, на твердых образцах - роста нет;
  • 2 степень - вырастает до 10 колоний;
  • 3 степень - число выросших колоний достигает 100;
  • 4 степень - распространенность и активность возбудителя очень активны, вырастает более 100 колоний.

Последние две степени считаются наиболее достоверными источниками информации об участии хеликобактер в патологических изменениях желудка.



Тестирование проводят методом иммуноферментного анализа со стандартными сыворотками

Иммунологические тесты показывают отрицательный результат, если антиген возбудителя не определяется, положительный - при наличии хеликобактериоза. Достоверность иммунологического и культурального методов значительно уступает ПЦР, для их проведения необходима массивная распространенность возбудителя в фекалиях.

Как подготовиться к сдаче анализа?

Где можно сдать анализ, укажет врач. Он же должен ознакомить пациента с правилами забора материала и подготовки. Некоторые частные клиники выдают посетителям напечатанную инструкцию «Как сдавать анализы». От соблюдения указанных условий зависит результативность исследования.

Общими правилами забора фекалий на выявления хеликобактер являются:

  • прекращение приема антибактериальных средств за трое суток до анализа;
  • контрольную сдачу анализа кала проводят через месяц после окончания курса лечения;
  • некоторые анализы требуют за три дня до исследования перейти на диету без продуктов с пищевой клетчаткой, исключить соленья, алкогольные напитки;
  • запрет на использование слабительных препаратов, ректальных свечей, если лечение требует ежедневного приема, нужно предупредить врача;
  • собирать кал нужно в чистую лабораторную посуду (выдается в клинике или покупается в аптеке), желательно отбор проб производить из трех точек;
  • непригодным считается кал с примесями слизи, гноя, крови, мочи;
  • доставка материала в лабораторию должна быть обеспечена в первые 2 часа, при необходимости разрешается хранить в холодильнике не более суток при температуре от 2 до 8 градусов.



Специальный набор для забора кала на анализ можно приобрести в аптеке

Дополнительные исследования

Пациент при диагностике не должен настаивать на изолированном исследовании кала. Используя дополнительные виды, врач повышает достоверность информации о заражении хеликобактерией.

Большой популярностью пользуются уреазные дыхательные тесты.

Проведение иммунологических исследований сыворотки крови может быть порекомендовано в случае необходимости дифференциальной диагностики формы поражения.

Неопровержимым видом обследования является цитологическое исследование образца слизистой желудка, полученного при биопсии во время фиброгастроскопического исследования. При высокой разрешающей возможности микроскопа лаборант видит окрашенную хеликобактерию.

Фиброгастроскопическая картина самой слизистой с характерными эрозиями, атрофией, изъязвлением указывает на косвенные признаки присутствия возбудителя в желудке. Рентгенологическая диагностика также позволяет по нарушениям в направлении складок, контуров желудка судить об органической патологии, вызванной хеликобактерией.

По итогам анализов врач может ввести пациента в группу риска с повышенной вероятностью заболевания язвой желудка, злокачественными опухолями. Предварительное применение специфического лечения позволяет снизить степень риска. При выборе медицинского учреждения для выполнения исследований на платных условиях нужно посоветоваться по поводу репутации и ответственности его сотрудников.

Лямблии обитают в тонком кишечнике, поэтому основные симптомы проявляются со стороны желудочно-кишечного тракта:

  • жидкий стул, иногда с частицами непереваренной пищи;
  • снижается всасывание витаминов и минералов;
  • увеличение размеров печени;
  • налет на языке;
  • снижение массы тела;
  • анемия, обусловленная нарушением всасываемости кишечника;
  • слабость вследствие нарушенного всасывания.

Также лямблии вызывают интоксикацию организма, которая проявляется увеличением лимфоузлов и аденоидов. При длительной инвазии появляется скрип зубами и нервные тики. Независимо от тяжести заболевания проявляется аллергический синдром.

Диагностика заболевания осложняется тем, что нет симптома, который однозначно бы описывал болезнь и мог бы послужить причиной для постановки диагноза.

Два варианта исследования на лямблиоз

В лабораториях предлагают пройти обследование двумя способами: прямым и косвенным.



Лабораторные исследования могут проводиться двумя способами

Прямые методы направлены на обнаружение яиц (цист) и самих возбудителей, либо проведение анализа кала на антиген лямблий. Их обнаружение служит непосредственным доказательством наличия лямблий в организме и основанием для постановки диагноза и проведения лечения. Подобные анализы используются и для контроля эффективности проведенного курсового лечения.

Второй метод - косвенный. Он заключается в выявлении антител в крови. Это широко распространенный и доступный метод, но достаточно специфичный. Он используется для решения такого вопроса, надо ли проводить более углубленное исследование.



Материал должен быть доставлен в течение 20 минут

Как правильно подготовиться и проводить исследование:

  • в течение недели не принимать антибактериальные и противоглистные препараты;
  • накануне перед проведением анализа следует выпить слабительное средство;
  • исследование проводят в течение 2-3 часов после сбора биоматериала или используют консерванты для увеличения сроков хранения, разводя фекалии с консервантом в пропорции 1:3.

Если есть возможность проведения диагностики на основе полимеразной цепной реакции, то рекомендуется провести предварительную подготовку.

Как сдавать фекалии на ПЦР:

  • прекратить прием слабительных препаратов;
  • не употреблять средства, способные изменить окрасу кала, например препараты с высоким содержанием железа;
  • приобрести в аптеке стерильный контейнер с палочкой;
  • не использовать свою тару;
  • при сборе материала не рекомендуется прикасаться к внутренней поверхности контейнера пальцами;
  • исключить попадание мочи в фекалии;
  • дефекация должна пройти естественным путем без искусственного стимулирования (клизма);
  • контейнер заполняется не более чем на 30% предназначенной для этого палочкой-лопаткой.

ВАМ ВСЕ ЕЩЕ КАЖЕТСЯ, ЧТО ОЧИСТИТЬ ОРГАНИЗМ ОТ ПАРАЗИТОВ НЕПРОСТО?

Судя по тому, что вы сейчас читаете эти строки - победа в борьбе с паразитами пока не на вашей стороне... И вы уже думали о кардинальных методах очищения организма? Оно и понятно, ведь паразиты опасны - они долго живут и активно размножаются в теле человека, поэтому заболевания, вызванные ими, принимают хроническое, постоянно рецидивирующее течение. Нервозность, нарушение сна и аппетита, иммунные нарушения, дисбактериоз кишечника... Все эти симптомы знакомы вам не понаслышке. Но возможно правильнее лечить не следствие, а причину? Рекомендуем прочитать интервью Шаповалова Олега Валентиновича - врача паразитолога высшей медицинской категории о современных методах избавления от паразитов...

Помимо данного исследования также проводится анализ крови на выявление лямблиоза, УЗИ, проводится полное обследование, которое поможет установить полную картину заражения.

Важно! Анализ кала при лямблиозе считается обязательным исследованием, все остальные могут быть лишь дополнением.

Как сдавать анализ

При исследовании изучаются сами фекалии и дуоденальное содержимое. В отходах человеческого организма можно обнаружить трофозиты лямблий, взрослые подвижные микроорганизмы, и цисты. Изучение проводится в лаборатории, есть два метода выявления лямблиоза: анализ на антиген и метод ПЦР, полимеразной цепной реакции.

Как подготовиться к сдаче

Сбор материала для исследования на лямблии ничем не отличается от других анализов кала. Перед забором не следует принимать слабительные средства и иные лекарственные препараты, они могут повлиять на конечный результат и испортить картину. Рацион человека перед забором не имеет значения.

Обычно анализы собирают в утреннее время, не следует собирать кал заранее, его нельзя хранить в обычных условиях. Если присутствует возможность, следует собрать материал для исследования за двадцать – тридцать минут до сдачи.

Собирать кал на анализ следует чистыми руками, для забора желательно пользоваться специальными стерильными контейнерами, которые продаются в аптеках или распространяются в поликлиниках. Не следует касаться стерильной поверхности изнутри, иначе можно занести посторонние бактерии, которые испортят результаты исследования.

Если приобрести специальный контейнер для анализов нет возможности, собрать материал можно в стеклянную банку или другую емкость из стекла, заранее прогретую при высоких температурах в духовке.


Собирать кал следует с нескольких мест, для проведения исследования достаточно небольшого количества.

Как хранить

Хранить уже собранный материал для исследования не стоит, он начинает в прямом смысле портиться из-за размножающихся бактерий и высыхания. Поэтому после сбора следует сразу же доставить материал для анализов в выбранную лабораторию.

Если такая возможность совсем отсутствует, можно воспользоваться специально существующими для таких случаев консервантами, наиболее распространены консервант Сафаралиева или Турдыева. Консервант заливают в емкость, в которой будет храниться материал для исследования, затем туда помещается кал.


Сколько раз сдавать анализ

Точность единожды сданного анализа стремится к 70%, что является не самым лучшим показателем. Поэтому исследование на выявление лямблиоза следует проводить несколько раз, для более точных результатов.

Также обязательно нужно провести исследование кала после лечения от лямблиоза, желательно несколько раз. Это нужно для подтверждения, что инфекция окончательно ушла. Также чтобы картина заболевания была более полной, кроме анализа кала советуют не пренебрегать другими методами диагностики.

Важно! Анализ кала можно дополнить исследованием крови на антитела к лямблиям.


Где сдать

Если нет времени ждать, хочется сразу получить результат, с которым уже впоследствии придется обращаться к врачу, пройти обследование можно в частной лаборатории или медицинском центре. Стоимость анализа в таком случае может колебаться от 300 до 1000 рублей, в зависимости от разновидности исследования и выбранного центра.

Сколько делается

Изготовление результатов анализов обычно делается несколько дней. Также существуют экспресс – тесты, однако они отличаются более низкой точностью. С получением результатов лучше не торопиться, самое главное – точность исследования, несколько дней не окажут сильного влияния на развитие заболевания.


Кал на антиген или ПЦР: что лучше

Оба варианта при полном соблюдении требований врачей и многоразовой сдачи будут одинаково эффективны, однако считается, что анализ ПЦР дает более точный результат. Поэтому если существует выбор, лучше провести исследование методикой ПЦР.

Анализ кала на лямблии положительный: что делать

При положительном результате анализа на лямблиоз следует обратиться к гастроэнтерологу с расшифровкой. Не стоит паниковать, лямблиоз хорошо поддается лечению, при правильной схеме терапии симптомы исчезают уже через несколько недель, организм быстро приходит в норму.

Посмотрев на заключение исследования, лечащий врач может оправить на дополнительное обследование, затем назначит лечение. Терапия лямблиоза обычно комплексная, требуется прием различных препаратов, обычно используют следующие средства:

  • энтеросорбенты, гепатопротекторы;
  • антибактериальные средства, антибиотики;
  • антигистаминные средства против последствий в виде аллергических реакций и другие лекарства.