Ифа на вирусный гепатит. Анализы гепатита с иногда выдают сомнительные результаты

16.05.2019 Гепатит

В некоторых случаях лаборатории могут давать сомнительный анализ, который неоднозначно подтверждает присутствие гепатита С в организме.

Методы диагностики антител

Для определения наличия гепатита С в организме проводят ряд анализов. Их результаты позволяют устанавливать факт присутствия вируса и определять состояние самой печени, а также степень ее поражения в результате этого заболевания.

Чтобы выявить в организме гепатит, проводят такие исследования:

Анализ на наличие антител к гепатиту С

Он позволяет определить в пробах крови присутствие суммарных антител к вирусу. Антитела – особые белки, которые продуцируются самим организмом человека в ответ на проникновение в него инфекции. Такие вещества бывают разных классов и могут выявляться очень долго, в некоторых случаях и пожизненно, даже если в организме и нет самого вируса.

Только этот положительный анализ сомнительно подтверждает наличие заболевания в организме, он может говорить лишь о контакте организма с вирусом. Хотя и отрицательный его результат тоже не является признаком отсутствия вируса, при недавнем инфицировании (до полугода) в крови еще могут не появиться антитела, хотя сам вирус в организме есть.

При особенностях иммунитета у некоторых пациентов с другими инфекциями или у беременных такой анализ может давать ложно-положительный или ложно-отрицательный – сомнительные результаты. Из-за этого для более точного диагностирования проводят и другие исследования.

  • Анализ антител lgM позволяет выявить антитела типа М к вирусу гепатита. Его положительный результат может свидетельствовать об активной фазе течения заболевания.
  • Анализ антител lgG. При положительном результате этого анализа он указывает на хроническую форму гепатита либо на уже перенесенный гепатит в прошлом.
  • Анализ на антитела к структурным либо неструктурным белкам гепатита С. Такой тест дает возможность определять в крови антитела к каждому из видов белков вируса гепатита С. Этот анализ позволяет более детально диагностировать болезнь: ее стадию, форму, а также степень пораженности вирусом. К примеру, обнаружение повышенного уровня антител к неструктурному белку NS3 указывает на , а антитела NS4 – на хроническое течение.

Для более точного определения наличия инфекции в организме и исключения сомнительных результатов используют и другие методики: анализ ПЦР и анализ на генотип вируса.

Качественный анализ ПЦР

Исследование полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяет выявить вирусную рибонуклеиновую кислоту (РНК) в организме человека. На присутствие вируса может указывать положительный результат такого качественного теста.

Данная методика также дает возможность проводить и количественное оценивание концентрации вируса, и его степень распространения в организме. Благодаря количественному анализу ПЦР, можно оценить результативность лечения, а также его адекватность.

Данный тест дает возможность выявить факт наличия в крови вируса гепатита. Его проводят всем людям, у которых были выявлены антитела к гепатиту. В результате исследования могут быть получены только два результата: «Обнаружено», «Не обнаружено».

Когда результат «Не обнаружено», это говорит только о том, что в анализируемом образце не выявлены фрагменты РНК, которые специфичны для вируса гепатита. Это довольно сомнительный анализ, поскольку у него есть предел границы чувствительности (около 50 МЕ/мл), ниже которого следы вируса могут быть и не выявлены. Это может обозначать, что если в пробе крови вируса очень немного, то результат такого анализа покажет «Не обнаружено», хотя возбудитель болезни и есть в организме.

Если же результатом является «Обнаружено», то это свидетельствует о том, что в крови присутствует вирус гепатита, он размножается и уже инфицирует клетки печени.

Проведение качественного ПЦР-анализа с низкими уровнями концентрациями, в особенности для проходящих лечение методами противовирусной терапии, требует оценивания этого показателя в соответствии с порогом чувствительности самой тест-системы.

В норме для здорового человека такой качественный тест дает результат «Не обнаружено». Нужно подчеркнуть, что в острой фазе гепатита РНК могут быть выявлены уже после 1–2 недель непосредственно после проникновения инфекции в организм, то есть задолго до появления антител к гепатиту.

Количественный анализ ПЦР

С помощью данного метода определяют степень концентрации вируса гепатита (вирусную нагрузку). Этот тест дает возможность выявить количество единиц генетического материала (самой РНК вируса) в определенном объеме. После проведения такого анализа могут быть определены следующие результаты:

  • Количественные показатели, выраженные в цифрах. Для определения концентрации вируса используют единицу измерения МЕ/мл (международные единицы на миллилитр). Некоторые лаборатории выдают его в количестве копий на миллилитр. Разные типы тест-систем имеют различные коэффициенты перевода этих показателей, но в среднем берут значение: 4 копии/мл соответствуют 1 МЕ/мл. Такой количественный анализ проводится на 1-й, 4-й, 12-й и 24-й неделе. Оценка на 12-й неделе показательна, поскольку дает возможность определить эффективность применяемой в лечении противовирусной терапии. Высоким считают показатель в 800000 МЕ/мл, он соответствует примерно 3000000 копий/мл. Низкой считается вирусная нагрузка, соответствующая параметру количественного ПЦР меньше 400000 МЕ/мл.
  • Оценка «Ниже диапазона измерений». Такой вердикт говорит о том, что результат довольно сомнительный. Данный количественный анализ не смог обнаружить вирусные РНК гепатита, хотя сам вирус есть в организме, но в малых концентрациях. Это подтверждает дополнительно выполненный качественный тест, который своим положительным результатом говорит о факте наличия вируса в организме.
  • Оценка «Не обнаружено». Этот результат свидетельствует о том, что количественный тест не выявил в пробах специфических РНК вируса гепатита С.

Анализ на генотип вируса

Такой анализ позволяет определить в сыворотке крови РНК вируса гепатита различных генотипов. Сейчас известно 11 генотипов такого вируса, и около 10 субтипов данных разновидностей. У нас в стране выявляют генотипы 1, 2 и 3-го генотипов. В лабораториях могут выявляться разнообразные субтипы: 1а и 1В, 2а и 2в или 2с, а также 3, 4 или 5, 6 генотипы с различными субтипами. Для всех таких разновидностей вирусов специфичность их определения составляет 100%. У некоторых больных могут выявляться одновременно два и больше генотипов гепатита, хотя преобладающим выступает лишь один.

Уточнение модификации генотипа вируса гепатита позволяет подобрать правильную терапию для лечения болезни. К примеру, генотипы 1 и 4 нуждаются в лечении на протяжении года, а для других видов генотипов достаточно и курса противовирусной терапии на 6 месяцев.

Такое генотипирование (выявления точного генотипа) является одним из самых важных анализов при определении диагноза. Этот тест позволит определить нужный метод терапии, ее интенсивность, а также и дозы используемых для лечения препаратов. Наличие того либо иного генотипа не говорит о том, что болезнь легче или тяжелее, это лишь констатация его разновидности и не более.

Этот тест позволяет определиться и со сроками лечения. К примеру, генотипы 2 и 3 могут лечиться стандартными методами терапии 24 недели с результатом эффективности в 85%, а генотипы 1-го и 4-го видов до 48 недель с эффективностью до 60%.

Методы исследований печени

Чтобы исключить сомнительные результаты, а также наличие других заболеваний печени, могут быть назначены и другие исследования:

  • УЗИ печени позволяет визуально определить состояние органа, а также исключить наличие некоторых других болезней, которые могли бы привести к схожим с гепатитом нарушениям в ее функционировании.
  • Биопсию печени применяют в диагностически сложных ситуациях для постановки точного диагноза. Ее суть заключается в получении микроскопического фрагмента печени при помощи острой иглы. Этот биоматериал в дальнейшем анализируют различными методами.

Определение состояния и степени повреждения печени


Для подтверждения диагноза могут проводиться также другие методы исследования и анализироваться ферменты печени:

  • Анализ АлАТ — биохимический анализ крови, позволяет выявлять аланинаминотрансферазу.
  • Анализ АсАТ дает возможность определить присутствие аспартатаминотранферазы.
  • Анализ ЛДГ — повышенный уровень содержания ЛДГ (лактатдегидрогеназы) может свидетельствовать о гипоксии и воспалительных процессах в печени.
  • Анализ ЩФ — этот фермент является катализатором биохимических реакций в печени и желчевыводящих путях. Его уровень сильно повышается, когда есть препятствия в оттоке желчи. К примеру, при холестазе.

Все печеночные ферменты: АЛТ, АСТ, ЛДГ и ЩФ в норме находятся внутри гепатоцитов (клеток печени).

Для всех людей с хронической формой гепатита С характерно периодическое (волнообразное) изменение уровней ферментов в печени. Такие показатели даже могут приходить в норму после проведенного лечения и выявляться в нормальных пределах в течение длительного периода. Этим больным рекомендуют сдавать анализы несколько раз в году для отслеживания динамики развития процесса. Если уровень ферментов выходит на стабильно нормальный показатель, то в последующем исследования могут проводиться и раз в год.

Другие методы исследований

Процессы разрушения печени дают возможность выводить эти ферменты в кровь, что приводит к резкому повышению их количества в анализах.


Для пациентов также могут быть назначены:

  • Анализ на билирубин. В пробах крови определяется уровень билирубина. Его повышенное содержание может свидетельствовать и о поражении печени.
  • Анализ протромбинового индекса. Это исследование позволяет характеризовать состояние уровня свертываемости крови. В образовании специфических белков для такого процесса принимает участие и печень. Уменьшенный результат протромбинового индекса может указывать на повышенный риск развития кровотечений. При хроническом гепатите такой показатель свидетельствует о тяжести течения болезни.

Для постановки окончательного точного диагноза недостаточно проведения одного из приведенных типов исследований. Каждый в отдельности тест может давать сомнительный результат и лишь их комплексный анализ позволяет окончательно определиться с диагнозом. Проведение такого большого числа различных анализов позволяет наиболее точно и достоверно определять заболевание и назначать адекватное лечение гепатита.

Только после исследования на антитела, получения результатов ПЦР и выяснения генотипа вируса, доктор может определить форму болезни, степень ее выраженности, а также дальнейшее лечение и возможный прогноз.

Среди самых опасных вирусных заболеваний - гепатит С. Это особо тяжелая форма. Часто бывает ложноположительный анализ на гепатит С, потому что его трудно диагностировать. Он может мутировать, проходить без симптомов, часто обращается в перманентную форму. Найти в организме вирус могут случайно: при диагностировании другого недуга или при постановлении на учет беременных.

Заразиться можно при переливании крови или при использовании одного шприца много раз (чаще так заражаются наркоманы), в салоне красоты (ногтевой сервис), у стоматолога, при операции по пересадке органов. Источником есть больные хронической или острой формой заболевания. Кровь инфицированного человека заразна в течение долгого периода: от нескольких недель, до нескольких лет.

Бывает ли ложноположительный анализ?

При сдаче любых анализов возможны ошибки. Но бывает как ложноотрицательный, так и положительный ответ на гепатит С. Это случается из-за ошибок медицинского персонала или воздействия других факторов. Чтобы обнаружить, заразен ли человек или что повлияло на ложный результат, надо провериться всесторонне и сдать анализы на маркеры инфицирования HCV.

Стрессовое состояние во время диагностики может спровоцировать ложный положительный результат.

На первом этапе используют иммуноферментный метод (ИФА) - осуществляется для нахождения в венозной крови антител к вирусу (маркеры инфицирования HCV). Отрицательный его результат означает, что пациент не инфицирован. Положительный результат не всегда однозначен. Ошибка метода для человека - существенный стресс.

Обнаруженные маркеры могут являться реакцией организма как на пребывание вируса, так и на то, что организм уже вылечился или реакцией на совсем другой вирус. То есть дает сомнительный результат на гепатит С. Поэтому врачи не всегда доверяют ему и определяют добавочные исследования:

  • общий анализ крови;
  • УЗИ печени;
  • УЗИ органов брюшной полости;
  • ПРЦ (полимеразная цепная реакция) - этот метод позволяет выяснить наличие инфекции, количество в организме, но когда концентрация вируса на антитела к гепатиту мала, то исход будет отрицательным (ошибочным);
  • рекомбинантный иммуноблот эссей (тест RIBA) - специфичный развернутый тест на гепатит, который не только выявляет, но и идентифицирует антитела, что направлены против вируса гепатита С (более точный, но и он порой дает ложноположительный результат).

Проблемы со здоровьем, что могут повлиять на результат

Ложноположительный результат возможен во время беременности.

После проведенных исследований методом ИФА сомнительный анализ (с ошибками) могут получить до 15% пациентов, при том что для беременных он выше. Причины ложноположительного явления:

  • ошибочные атаки иммунной системы на ткани собственных органов, как на чужеродные (болезни аутоиммунного характера);
  • опухоли (доброкачественные и злокачественные);
  • онкологические заболевания;
  • новообразования в организме;
  • беременность;
  • инфекции, которые проходят в тяжелой форме;
  • сбои в работе иммунной системы;
  • наличие гепарина в крови вследствие принятия некоторых препаратов;
  • употребление иммуностимулирующих медикаментов;
  • диагностика в инкубационный период на очень ранней фазе, когда иммунитет не отреагировал, потому что концентрация вируса мала;
  • иммуносупрессивные пациенты (которые подавляют иммунитет);
  • новорожденные с внутриутробными инфекциями (антитела, переданные от матери);
  • высокий уровень криоглобулина в крови;
  • острые болезни верхних дыхательных путей;
  • нужно повременить с анализом, если прививались от гриппа или столбняка.
Результат анализа будет ложноотрицательным в первые две недели инфицирования.

Инфицированность гепатитом С в данных случаях подтверждается только при положительном результате в следующих исследованиях. Ложноотрицательные результаты устанавливают при проведении тестирования раньше двухнедельного срока со дня заражения. За этот период маркеры не формируются. Поэтому пациенту стоит обращать внимание на изменения в своем организме и через некоторое время пересдать анализы.

Другие причины

Кроме проблем со здоровьем, причинами ложноположительного результата бывают:

  1. ошибки лаборантов - малоопытность, случайные подмены пробирок, опечатки в результатах, неверная подготовка образца к анализу;
  2. неправильная транспортировка и несоблюдение температурных режимов хранения;
  3. начальные стадии болезни;
  4. низкое качество проведения исследований;
  5. загрязнения биоматериалов;
  6. воздействие высоких температур на образцы;
  7. возможен разный результат при использовании наборов для диагностики от разных производителей.

Причины ложноположительного результата анализа на гепатит С при беременности

Проявления симптомов гепатита у беременных можно принять за токсикоз.

Узнав о беременности, женщина обращается в женскую консультацию для постановки на учет. При этом ей предстоит не единожды сдавать целый список анализов. Один из них на гепатит С при беременности. При этом часто результат неблагоприятный. Не стоит сразу впадать в панику. При беременности нередко отображаются ложноположительные результаты.

Врачи с большим опытом назначают несколько исследований, прежде чем поставить диагноз, потому что в период беременности организм перестраивается и результат анализов может быть ошибочный. Причиной этому есть изменение в гормональном фоне, нарушения метаболизма, грипп, простуда, изменения в белках крови, начало вынашивания плода. Плазма крови беременных считается сложной, что может повысить недостоверность результата.

Отрицательный результат означает, что женщина не инфицирована и не является носителем антител или же они не успели выработаться при недавнем заражении. Поэтому этот анализ сдают несколько раз для достоверности результата. Опасность болезни в том, что она протекает бессимптомно и похожа на признаки токсикоза. Определив на ранней стадии заболевание, это позволит оградить еще не родившегося малыша, врачей, остальных пациенток от заражения и позволит подготовиться к возможным проблемам.

При положительном результате женщине нужно успокоиться и обо всем подумать. Опасность инфицирования плода невелика. Антитела пассивно могут передаться в процессе вынашивания ребенка. В случае нервного состояния у матери и плода может снизиться иммунитет. Это послужит увеличению вируса и в результате перейдет в хроническую или острую фазу гепатита С. Ребенок может родиться с анти-HCV в крови.

Как предупредить ложные плохие результаты?

Перед проведением лабораторных исследований на гепатит С специальных советов нет. По возможности лучше сдать анализ в нескольких лабораториях. Кровь надо сдавать при отсутствии гриппа и ОРВИ. Можно провести исследования на наличия в крови ДНК и РНК вируса гепатита С, их проводят только в платных клиниках. Также сообщить врачу о приеме лекарств и хронических болезнях, если такие имеются. Смотреть, чтобы забор крови делали стерильным инструментом.

Следует помнить, что бывает ложноположительный С, и такие результаты требуют перепроверки. Ведь гепатит С является самой тяжелой формой болезни, и положительная проба воспринимается как приговор.

Ряд причин может вызвать ошибочное тестирование болезни. Ложноположительный С хотя и встречается достаточно редко, но должен учитываться при диагностировании. Ошибка врачей в этом вопросе может нанести серьезную психологическую травму человеку.

Методы диагностики

Установить болезнь и назначить лечение могут только специализированные врачи: врач-инфекционист — на стадии острого гепатита и врач-гепатолог или врач-гастроэнтеролог — при хронической форме. Для первичного диагностирования гепатита применяется иммуноферментный метод (ИФА). Этим способом устанавливаются маркеры наличия HCV-вируса в венозной крови человека, путем выявления и определения концентрации антител вируса.

Постановка диагноза методом ИФА имеет определенные сложности. Наличие антител не может однозначно указывать на наличие болезнетворного вируса в организме в данный момент: вирус может быть уже уничтожен, или антитела выработаны в результате реакции иммунной системы на другую инфекцию. Если получен отрицательный результат, то все ясно: организм никогда не имел контакта с вирусом гепатита. Другое дело — положительный результат, который может неправильно указывать на болезнь.

Для уточнения диагноза существуют иные способы исследования. Наиболее простые исследования — общий анализ крови, биохимический анализ крови, определение полимеразной цепной реакции ПЦР, УЗИ печени, селезенки, желчного пузыря и поджелудочной железы. Положительный итог первичного исследования проверяется дополнительным тестом рекомбинантного иммуноблотинга РИБА.

Анализ результатов ИФА

Методом ИФА определяется суммарное содержание антител к вирусу гепатита С. В общем случае антитела подразделяются на IgM тип, вырабатываемый при острой форме болезни, и IgG тип, характерный для хронического процесса. Антитела IgM удается обнаружить через 10-14 дней после инфицирования организма, и существуют они 3-5 месяцев. Антитела IgG вырабатываются значительно позже, но продолжают находиться в организме в течение 8-10 лет даже после уничтожения вируса.

Отрицательный результат проверки ИФА говорит об отсутствии антител обоих типов. При этом следует помнить, что он не учитывает возможность проникновения вируса в организм в течение последних двух недель перед исследованием, так как антитела не успели выработаться.

Положительный результат указывает на наличие антител обоих типов или одного из них. Чаще всего это указывает на начало острой вирусной формы гепатита С или протекание хронической формы заболевания. Однако такой показатель может стать следствием уже вылеченной болезни или указывать, что человек является только носителем вируса. Иногда тест дает ложноположительный С, что может быть вызвано рядом факторов.

Причины ложноположительного результата

В практике применения метода ИФА ложноположительный результат составляет до 15% от всех положительных результатов, причем для беременных женщин этот процент значительно выше.

К такому показателю могут привести следующие причины:

  • аутоиммунные формы заболеваний;
  • доброкачественные и злокачественные образования;
  • инфицирование другими сложными болезнетворными микроорганизмами.

Достаточно часто диагноз устанавливается ложно у беременных женщин. Это вызвано тем, что при беременности протекает процесс гестации, который сопровождается образованием специфических белков, изменением гормонального фона организма и микроэлементного состава крови, увеличением содержания цитокинов. Таким образом, пробы кровяной плазмы беременных женщин становятся сложными для однозначного анализа и ошибочно указывают на наличие антител к различным инфекционным вирусам, в т.ч. вирусу гепатита С.

Ложноположительные результаты могут устанавливаться у людей, зараженных другими инфекциями. Это связано с индивидуальными особенностями иммунной системы человека, которая неоднозначно отреагировала на проникновение болезнетворного вируса. Ситуацию усугубляет прием иммунодепрессантов.

На появление ложноположительного результата может повлиять человеческий фактор. Причины самые прозаические:

В настоящее время общепризнаны следующие причины, вызывающие ложные анализы:

  1. Малоисследованные перекрестные реакции.
  2. Беременность; наличие в организме рибонуклеопротеинов.
  3. Острая инфекция верхних дыхательных путей.
  4. Сложные формы гриппа, различные ретровирусы.
  5. Недавняя вакцинация от гриппа, гепатита В или столбняка.
  6. Болезни в форме туберкулеза, герпеса, малярии, некоторых видов лихорадки, артрита, склеродермии, рассеянного склероза, грыжи, почечной недостаточности.
  7. Недавнее проведение альфа-интерфероновой терапии.
  8. Индивидуальное повышение содержания билирубина в крови.
  9. Проявление липемической сыворотки, индивидуальные особенности иммунной системы, выраженные в естественной выработке антител и активности иммунных комплексов, и некоторые другие.

Особенности заболевания

Гепатит С — это острая форма инфекционного поражения печени человека. Он вызывается HCV-вирусом, имеющим несколько генотипов и множество разновидностей.

Мутационные способности вируса вызывают сложности в диагностировании и лечении и приводят к тому, что до сих пор вакцина против этого заболевания не разработана.

Начальный период болезни протекает медленно и обычно не проявляет заметных симптомов. Инкубационный период такого гепатита может достигать 5 месяцев (наиболее характерно — 50 дней). Вялотекущая фаза (до 10 дней) может проявляться лишь в небольшой общей слабости организма и бессоннице. Активная аккумуляция антител и активизация аминотрансфераз приводит к потемнению мочи и желтухе на теле и белках глаз. Последующее прогрессирование болезни вызывает белизну кала, зуд и заметное увеличение печени. Содержание билирубина и аминотрансфераз в крови резко увеличивается.

Гепатит С — трудноизлечимое заболевание, и только порядка 20% людей излечиваются полностью. Почти столько же людей, перенесших острое заболевание, получают статус носителей вируса гепатита С. Они, как правило, не болеют (т.е. печень остается в норме), но могут диагностироваться как больные при случайном обследовании на гепатит или, что гораздо хуже, стать источником инфекции для других. Как показывает практика, почти у двух третей переболевших заболевание переходит в хроническую форму. Такая форма болезни может долго протекать без серьезных осложнений, но имеет характерные симптомы, такие как:

  • периодическая тошнота;
  • болевые ощущения в области живота;
  • нудные суставные боли;
  • частые поносы.

Дополнительные анализы

В случае получения положительного результата по методу ИФА его необходимо проверить другими способами. Прежде всего проводится исследование ПЦР. Метод ПЦР используется:

  • для уточнения результата ИФА;
  • отделения гепатита С от других типов гепатитов;
  • определения стадии развития болезни;
  • контроля проведения лечебных процедур.

Этот способ позволяет определить содержание, концентрацию и активность непосредственно вируса гепатита С, что позволяет более точно диагностировать заболевание. В то же время метод ПЦР тоже может привести к ложноположительному результату на фоне перекрестных реакций. Отсутствие дополнительных серологических маркеров не способно полностью исключить ошибку в диагностировании.

Всемирная организация здравоохранения рекомендует проведение трехкратных подтверждающих исследований. Всеми доступными методами должен определяться уровень трансаминазы, концентрация HCV-вируса, генотип вируса, уровень виремии в крови, гистологические процессы в печени.

Весь комплекс диагностирования должен включать определенные исследования. Анализ на ИЛ-28В определяет генотип вируса. Общий анализ крови проводится на проверку содержания эритроцитов, гематокрита, лейкоцитов, тромбоцитов, моноцитов, СОЭ и других компонентов крови. Биохимический анализ крови направлен на выявление содержания билирубина, АЛТ, АСТ, сывороточного железа и других составов. Оценка функции печени производится по белковым фракциям, альбумину, коагулограмме.

Для выявления вирусных гепатитов в организме медицина широко применяет метод иммуноферментного анализа, основанного на выявлении концентрации и вида антигенов с помощью антител и ферментов. Проводится поэтапно, путем лабораторных исследований, с высокой точностью показаний. В зависимости от количества и класса антител изменяется цвет и концентрация фермента, который использует ИФА и, согласно этому, врач диагностирует заболевание.

Что такое ИФА?

Наличие вирусного гепатита в организме больного определяют с помощью серологического метода анализа крови на присутствие вируса HCV и маркеров (тел и антител), на него указывающих. Иммуноферментный анализ (ИФА) исследует разные вирусы, низкомолекулярные соединения, макромолекулы, их качественный и количественный показатели, используя проявление реакции на их антигены. Для этого применяют фермент, как метку для сигнальной регистрации. Его все шире используют в медицине, поскольку ИФА четко находит строго определенные антигены, не путая их с другими, имеет высокую чувствительность к наличию инвазии при вирусном гепатите.

Анализ нужно сдавать натощак.

Минус такой диагностики - невозможность выявить причину болезни, так как метод указывает только на реакцию иммунной системы организма. На результаты анализа влияет вакцинация, проведенная ранее. За 8 часов перед проведением анализа рекомендуется воздержаться от приема пищи, никотина, алкоголя. Основа ИФА теста - ферментативная и иммунная реакция организма на вирус. Биологические молекулы связываются с клеткой и ее элементами, микроорганизмами, обнаруживают вирус, далее работают ферменты, которые позволяют выразить иммунную реакцию в видимый и измеримый параметр.

Показания к анализу

Вирусные гепатиты в организме могут стать причиной возникновения онкологических заболеваний и цирроза печени. Важность своевременной диагностики неоспорима. Первичным способом диагностики является тест ИФА, который с высокой точностью определяет наличие HCV вируса (IgM и IgG) и активность его микроэлементов. В обязательном порядке анализы на вирусный гепатит сдают:

  1. Люди с групп риска (наркозависимые, болеющие СПИДом, работники медицинских и правоохранительных учреждений).
  2. Люди с острой или хронической формой гепатита.
  3. Беременные и планирующие беременность женщины.

ИФА распознает болезнь на любой стадии. Результаты анализа, в среднем, готовы за 2 дня.

Критерии, что определяют важность анализа

Иммуноферментный анализ крови поможет определить стадию болезни.

ИФА тест определяет наличие антител класса IgG, IgM, IgA. При диагностике вирусного гепатита врач не обращает внимания на их тип, так как присутствие любого такого проявления вируса HCV уже указывает на острую или хроническую стадию протекания болезни. На ранних стадиях заболевания повышается уровень IgM (через 5 дней после заражения); на 15-20 день появляются IgG антитела и могут долгое время находиться в крови человека даже после излечения; IgA - появляется через 10-14 дней, снижается после лечения.

В случае, если IgG и IgA обнаруживаются после применения препаратов и их уровень остается в том же показателе - у носителя хроническая форма гепатита. Важным критерием теста будет четкое определение класса имеющихся антител и их количества. На основании этого можно знать не просто о наличие заболевания, но и стадию его развития. Обнаружение таких элементов в крови больного дает возможность назначить правильное и своевременное лечение для предотвращения более тяжелых последствий.

Как проводится?

Выделяют прямой и не прямой тест ИФА. Этапы прямого:

  1. Сбор биологического материала и размещение его в специальных лунках.
  2. В течение 15-30 мин. антигены прикрепляются к поверхности лунок.
  3. Добавление антител в лунки к найденному антигену. Оставляется все на 1-5 часов.
  4. Удаления неприкрепленных антигенов (выливание содержимого лунок).
  5. Ополаскивание лунок специальным раствором.
  6. Добавления ферментного раствора в лунки. Оставляют на 30 мин.-1 час.
  7. Использование колориметрии (выявление цвета и концентрации окраса содержимого лунки, сопоставление с показателями, которые прямо пропорциональны с концентрацией вируса).
Использование для диагностики непрямого метода ИФА даст более точный результат.

Непрямой метод ИФА проходит при применении немеченных антител к найденным антигенам и впоследствии добавлении к ним меченных. Сначала берется кровь у пациента и разносится по лункам на 15-30 мин. (антитела фиксируются с лунками). Потом в них вносятся немеченные антитела на 1-5 часов (образуется связь антител с антигенами - иммунный комплекс). Далее не прикрепленные микроэлементы выливаются с лунок и промываются специальным раствором. На следующем этапе лаборант добавляет в лунки меченные микроэлементы на 15-30 мин. (при этом связываются немеченные с меченными с образованием комплекса «антитело-антитело-антиген»). Повторно удаляются лишние (незакрепленные) при сливании и промывке раствором. Далее вносится фермент, который меняет цвет за 5-30 мин. пребывания в лунках и данные окраса сверяются с данными показателей таблиц. Непрямой метод ИФА более точный.

Что показывает ИФА при анализе на вирусный гепатит?

Иммуноферментный анализ позволяет выявить наличие инфекции (вирусы гепатита всех видов, ВИЧ, герпес, сифилис, цитомегаловирус, корь, краснуху, вирус паротита, вирус Эпштейн-Барра), является маркером аутоиммунных заболеваний, раковых клеток. Указывает на нарушения репродуктивных функций (изменения уровня тестостерона, пролактина, эстрадиола и прогестерона), сбой работы щитовидной железы, инвазию гельминтами, хламидиями. Эффективен для выявления уреаплазмоза, коклюша, вируса Данге, вируса Западного Нила, Боррелии. Список определений высок, включает много наименований.

Подтверждение результатов

Определение антигена вируса HCV методом ИФА дает 98% точность. Его также используют для повторного тестирования биологического материала при нечетких предыдущих показателях. Наличие IgM антигенов не является показателем на гепатит острой формы и требует дополнительных исследований. При повторном проведении ИФА теста результаты совпадают на 90-100%. В случаях минимального расхождения как показатель принимается среднее значение. Для получения максимальной точности в показателях врачи советуют параллельно проводить биохимический анализ крови. Для проверки результатов после иммуноферментного анализа можно использовать другие способы диагностики.